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News Center乙醇—超声波还原法(Baigent和Muller,1980)(1)取1%AuCl3·HCl水溶液lml加入100ml双重蒸馏水。(2)用0.2m01/LK2C03调pH至7.2,再加入lml无水乙醇。(3)用20KC、135W超声波探头浸入溶液内进行超声振荡,此法制备的颗粒为6~10nm。硼氢化钠还原法(Tschopp等,1982)(1)取0.6ml1%氯化金水溶液,加入40ml预冷(4℃)双蒸馏水。(2)再加入0.2mol/LK2C030.2ml。(3)边搅拌边加入新鲜配制...
『安全』是进行任何实验zui重要的考量,若不留意,经?;嵩斐?的遗憾,因此,请遵守以下各项规定:1.请事先勘查紧急冲洗站、洗眼台及灭火器的位置。2.请避免穿着凉鞋或拖鞋(脚趾不要裸露),并请穿着实验衣。留长发者,在实验进行前将头发束好。3.在实验室请勿吸烟、化妆、嚼口香糖、吃东西、喝饮料。食物不可存放于实验室的冰箱中。4.实验前后请将工作区域清理擦拭干净,实验中打翻任何药品试剂时,要随时清理;离开实验室前请记得洗手。5.使用刻度吸管时,切勿用嘴吸取,请用安全吸球或吸管唧筒。6...
微量移液器(micropipet)是进行生化实验或分子生物学实验的*工具,然而使用方法的正确与否,以及微量移液器的准确性,都直接影响了实验结果的正确性,故请对你持有之微量移液器作深入的认识。本实验室所使用的微量移液器为GilsonPipetmanP系列,包括P1000,P200,P20等。以下使用方法及注意事项,部份取材自原厂所附說明书,请详读之后才进行实验。1)请参照图1.1,认识微量移液器每一部份组件之位置及名称。2)将D(ejector)取下,C(connectingn...
仪器用具:迷你电泳槽及铸胶器(MupidII);UVtransilluminator及影像分析系统;防护面罩药品试剂:琼脂糖粉末(agarose,lowEEO)1×TAE电泳缓冲液(40mMTris-acetate,1mMEDTA,pH8.0):由50×TAE(每1L含242gTrisbase,57.1mLglacialaceticacid,100mL的0.5MEDTA-8.0)稀释使用。10×追踪染剂(0.25%bromophenolblue,0.25%xylenecyan...
仪器用具:37℃及65℃水浴或恒温槽药品试剂:质体pBluescriptIISK(-)限制酶:BamHI,PvuII及ScaI(浓度均为10units/μL,Invitrogen)10×Reactionbuffer6(0.5MTris-HCl,pH7.4;60mMMgCl2;0.5MNaCl;0.5MKCl)无菌水方法步骤:1)取7支微量离心管,依下表所列体积(单位μL)依序加于管壁不同位置上。◆每次吸取限制酶时,请换一支新的微量移液器头以免造成污染。总体积为20μL,短暂离...
方法步骤:1)前一天转形的培养皿,当菌落长至约0.5mm大小时,将培养皿移至4℃放置1h。2)准备一张无菌的硝化纤维滤膜,以铅笔在边缘标上组别?!羟氪魇痔缀笤倌萌÷四?!3)打开培养皿盖子,以两支扁平镊子将滤膜两边夹住,轻轻覆盖在菌落上方,尽可能避免有气泡产生?!糇⒁猓÷四じ哺巧先ズ缶筒灰僖贫?!4)等滤膜*湿透后,以针头在滤膜边缘戳洞做记号(至少做三个记号)。小心把滤膜掀起,菌落朝上放置在LB/Amp/IPTGplate上。盖上盖子,在37℃培养2~4h,以诱导启动T5pro...
仪器用具:平端镊子药品试剂:Nitrocellulose滤膜LB/Amp/IPTG/X-Glucplate(LBplate添加100μg/mLampicillin,0.2MIPTG,50μg/mLX-Gluc)方法步骤:1)前一天进行转形的培养皿,当菌落长至约0.5mm大小时,将培养皿移至4℃放置至少1h。2)准备一张无菌的硝化纤维滤膜,以铅笔在边缘标上组别。◆请戴手套后再拿取滤膜!3)打开培养皿盖子,以两支扁平镊子将滤膜两边夹住,轻轻覆盖在菌落上方,尽可能避免有气泡产生?!?..
方法步骤:1)吸取20μL的蛋白质样本,小心注入微量滴定盘中,避免气泡产生。2)每一样品槽加入200μL基质液,混合均匀;可用烧热的接种环去除气泡。3)静置约1~2min,颜色开始加深,然后加入30μL终止液。反应时间的长短,要以样本中的酶活性大小來做调整。因为我们只测定色析法各分划的相对酶活性,因此并不加终止液。4)以ELISA光度计测定波长415nm的吸光值。酶活性单位的测定:a.以上步骤,只可测定GUS活性的相对大小,对色析法所得到的各个分划进行侦测,相当方便,但并非酶...