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1．合成需要的靶标DNA或RNA寡核苷酸，其中一组是5’端连接生物素的寡核苷酸链。为dsDNA位点合成一条不联结生物素的互补副链。2．①对于DNA位点的筛选，将每条寡核苷酸链各取10u1，与20/A1的2X核酸退火缓冲液混匀，让两条互补的寡核苷酸退火。在PCR仪中以94℃加热样品3分钟，然后以每分钟2℃的速度冷却至4℃。冷却后，用水将溶液稀释至1pmol/L的终浓度，于-20℃保存。②对于RNA位点筛选，用RNA折叠缓冲液（1XCM）配制1pm01/L的寡核苷酸溶液。将溶液加...
A.噬菌体的制备1．挑取含有源自文库筛选的噬菌体克隆的单菌落。用灭菌牙签挑取单菌落接种于灭菌圆底培养板的微孔内，其中加有150ul含15ug/ml的四环素的2×TY培养基。用一个微孔培养展示野生型DNA/RNA结合区域的噬菌体，作为阳性对照。以250r/min的速度小心振荡微孔板，30℃培养16小时。2．在合适的吊斗式离心机中3700g离心96孔培养板15分钟，以制备噬菌体上清液。将上清液转移到一个新的微孔板内，4℃保存。B.噬菌体ELISA1，将生物素联结的核酸靶标位点（通...
植物体内的一种激素脱落酸可帮助植物对抗干旱等恶劣生存条件，但科学界对这类植物激素的具体作用机制却知之甚少。西班牙等国研究人员日前发现脱落酸帮助植物抗旱的具体机制，为有效提高植物抗旱能力开辟了新思路。此前研究曾发现，在正常环境下，植物体内一种名为PP2C的蛋白质会阻止脱落酸发挥作用，当植物处于极度干旱条件下时，这种阻断作用就会消失，植物细胞中脱落酸的含量上升，从而帮助植物抗旱。研究同时认为，PP2C蛋白质并不会直接作用于脱落酸，而是通过另外一群蛋白质间接发挥作用。这些“中介蛋白...
体外诊断产业是医疗器械及医药工业的一个组成部分，中国体外诊断产业是个新兴产业，共有20二十年左右的发展历史，是一个自发形成和成长起来的产行业。体外诊断是指将样本（血液、体液、组织等）从人体中取出后进行检测进而进行诊断，是相对于体内诊断而言。检测过程中需要相应的仪器和试剂，而这些仪器和试剂就组成了体外诊断系统，从事这些仪器和试剂研发、生产和营销的企业就形成了体外诊断产行业，它汇集了生物、医学、电子、机械等相关技术。体外诊断产品按检验医学的检测项目可分为几个主要大类：生化、免疫、...
该系统的主要影响因素是因在蛋白上引入标记物可导致蛋白生物活性改变，因为标记的结果，本质上是制造了一个由目的蛋白和标记物氨基酸序列融合而成新的蛋白。因此，使用该技术时，应该认识到是研究新的蛋白特性，而不是研究蛋白的原来特性。但实践经验表明这并不成为很大的问题，通过标记蛋白获得的信息可以采用针对原始未标记蛋白的抗体证实。第二方面的主要影响因素是在进行表位标记时，许多目前使用的标记物是由已知的蛋白（如myc基因产品）片段组成。这意味着抗标记物抗体不仅识别被研究的标记蛋白，同时还可能...
将抗原结合到抗体微珠基质上的zui简单方法是将微珠装到一个层析柱内，将抗原溶液流经层析柱，当抗原流经层析柱时结合到抗体上而被固定，直到洗脱时才洗脱下来。这种方法的效率是根据抗原与固定的抗体之间的接触时间决定的，所以抗原抗体之间的作用时间可以用低流速而延长。这种方法zui大一个问题就是某些蛋白非特异性结合到分离柱上，这些蛋白可以出现在洗脱液中，从而使纯化效率降低?；时旧砗涂固寤矢春衔锞哂杏氪炜乖芤褐械鞍字史翘匾煨越岷系谋砻婊钚?。虽然这些反应较正常的抗原—抗体反应要弱得多...
淋巴细胞脉络丛脑膜炎（1ymphocyticchoriomeningitis）是由淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒引起的急性传染病。临床表现多样，典型表现为急性无菌性脑膜炎，严重者可出现脑膜脑炎。该病一般为自限性，预后良好。[病因学]淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒属沙粒病毒属，为RNA病毒，是zui早发现与人类无菌性脑膜炎相关的病毒之一。病毒先侵入呼吸道上皮细胞繁殖，然后进入血液循环致病毒血症，此期可通过血脑脊液屏障而致脑膜、脉络丛有淋巴细胞及单核细胞浸润，脑实质水肿等病变。[实验室诊断]...
狂犬病（rabies）是狂犬病毒引起的传染病。犬、猫、狼是狂犬病毒的主要储存宿主。人被病犬（或病猫等）咬伤后，病畜唾液中的病毒经伤口侵入人体，沿周围神经（主要是感觉神经）至背根节经脊髓人脑而致病。[病因学]狂犬病病毒是负链RNA病毒，属弹状病毒科的弹状病毒属。该病毒编码两种主要蛋白，一种为G蛋白，它是病毒包膜外突起的基本单位，诱导产生中和抗体；另一种为病毒颗粒内部的N蛋白，诱导补体结合抗体、荧光抗体等，根据狂犬病病毒N、G基因的遗传差异，狂犬病病毒可分为6种基因型，其中1～4...
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